在酶免疫技術中，常用的酶主要有辣根過氧化物酶（HRP）、堿性磷酸酶（ALP）以及β-半乳糖苷酶。這些酶因其高催化效率、穩(wěn)定性好、易于純化和標記等優(yōu)點而在免疫檢測中廣泛應用。
1. 辣根過氧化物酶（HRP）：是最常用的標記酶之一，具有良好的穩(wěn)定性和較高的敏感度。它能夠與多種底物反應產生顏色變化或發(fā)光現(xiàn)象，便于定性或定量分析。在ELISA、Western Blot等實驗技術中應用廣泛。
2. 堿性磷酸酶（ALP）：該酶對pH值的適應范圍較廣，在堿性環(huán)境下活性最強。其底物種類多，如NBT/BCIP可產生藍色沉淀，適用于組織化學染色；當使用熒光或發(fā)光底物時，則可用于高靈敏度檢測。
3. β-半乳糖苷酶：此酶主要應用于基因工程領域，特別是在藍白斑篩選中起到重要作用。此外，在某些特定的免疫測定方法中也作為標記酶使用，如ELISPOT技術等。

這些酶的選擇取決于具體的實驗需求、底物類型以及預期的結果形式（比如顏色變化、熒光或發(fā)光）。在實際操作過程中，還需要考慮成本效益比等因素來確定最合適的酶種類。